Сибирская язва морфология культуральные свойства
Глава 30. Возбудитель сибирской язвы
Возбудитель сибирской язвы Bacillus anthracis включен в семейство Bacillaceae, род Bacillus. Название болезни — «углевик» дано русским врачом Андриевским, который в конце XVIII века изучал это заболевание в Сибири во время большой эпизоотии среди коров.
Возбудитель сибирской язвы был открыт Паллендером в 1849 г. Большой вклад в изучение этого заболевания внесли Р. Кох, Л. Пастер и Л. С. Ценковский.
Морфология. Возбудители сибирской язвы — крупные палочки 6-8 × 1-1,5 мкм с обрубленными или несколько вогнутыми концами. Грамположительны. В организме они располагаются попарно или в виде коротких цепочек. На питательных средах встречаются длинные цепочки. Бациллы сибирской язвы неподвижны. В организме образуют капсулу, окружающую одну, две особи или всю цепочку. Бациллы сибирской язвы образуют споры овальной формы, расположенные в центре и не превышающие поперечника микробной клетки. Спорообразование лучше всего происходит при доступе кислорода и температуре 30-40° С. При температуре выше 43° С и ниже 15° С спорообразование прекращается. В период образования спор цитоплазма клетки почти полностью лизируется, клеточная стенка разрывается и спора выходит наружу (рис. 47).
Рис. 47. Морфологические и культуральные свойства возбудителя сибирской язвы (Bacillus anthracis). а — В. anthracis (в крови мыши); б — образование капсул; в — споры; г — рост колонии; д — рост культуры на МПБ; е — рост культуры на желатине
Культивирование. Возбудители сибирской язвы — факультативные анаэробы. Неприхотливы. Растут при температуре 35-38° С и рН среды 7,2-7,6. На МПА образуют крупные колонии с неровными бахромчатыми краями (R-форма). От края колонии отходят пучки нитей. Вид колоний напоминает голову медузы или львиную гриву. R-форма является характерной для вирулентных штаммов сибиреязвенных бацилл. В старых культурах появляются гладкие S-формы колоний — не вирулентные.
В бульоне рост сибиреязвенных бацилл характеризуется придонным ростом. На дне пробирки образуется осадок в виде комка ваты, при этом среда остается прозрачной.
При посеве на 10-12% желатин после 2-3-дневной инкубации появляется рост по ходу укола в виде белых тяжей, уменьшающихся книзу (вид опрокинутой елочки).
При посеве возбудителей на МПА с пенициллином (на пластинчатом агаре) наблюдается распад бацилл на шары, цепь из которых напоминает жемчужное ожерелье. Характер роста на средах имеет диагностическое значение (см. рис. 47).
Ферментативные свойства. Сибиреязвенные бациллы обладают выраженной ферментативной активностью. Сахаролитические свойства: расщепляют глюкозу, лактозу, мальтозу, левулезу и другие сахара до образования кислоты.
Протеолитические свойства выражаются в пептонизации молока, разжижении желатина, свертывании молока (медленно). Они образуют сероводород и аммиак, переводят нитраты в нитриты, гидролизируют крахмал и т. д. Не гемолизируют эритроциты, чем отличаются от Вантракоида. Лизируются противосибиреязвенным фагом. Сибиреязвенные бациллы образуют ферменты: диастазу, пероксидазу, липазу.
Токсинообразование. В. anthracis образует токсин — протеиновый комплекс, содержащий отечный и летальные факторы. Этот токсин называют «мышиный токсин» (ввиду высокой чувствительности мышей). Большая роль в вирулентности сибиреязвенных бацилл принадлежит капсуле, которая связана с токсическим веществом.
Антигенная структура. Бациллы сибирской язвы содержат два антигена: 1) соматический (полисахаридный), который находится в клеточной стенке микроба. Термоустойчив. Против этого антигена антитела не продуцируются. Этот антиген длительно сохраняется в культурах и трупном материале. На его обнаружении основана реакция преципитации Асколи; 2) капсульный (протеиновый) антиген, обусловливающий антифагоцитарное действие.
Находясь в организме или на средах, содержащих экстракты тканей, бациллы сибирской язвы вырабатывают протективный термолабильный антиген, который является атоксичным, но обладает иммунизирующей способностью.
У сибиреязвенных бацилл имеется общий антиген с антракоидом и другими спорообразующими сапрофитами (В subtilis, B. cereus и др.).
Устойчивость к факторам окружающей среды. Вегетативные формы возбудителей сибирской язвы малоустойчивы. При 100° С они погибают мгновенно, температура 55-60° С губит их через 30-40 мин. Обычные концентрации дезинфицирующих растворов убивают их через несколько минут. Капсулы сибиреязвенных бацилл обладают большой устойчивостью. При исследовании трупов животных, подвергнутых действию гнилостной микрофлоры, можно обнаружить пустые капсулы (тени). Споры устойчивы: они выдерживают кипячение на протяжении 15-20 мин. Автоклавирование (120° С) убивает их через 20 мин. К низким температурам не чувствительны. В сухом состоянии сохраняются до 30 лет, в почве — десятилетия.
Обычные растворы дезинфицирующих веществ губят их через 2-3 сут (табл. 46).
Таблица 46. Свойства возбудителей сибирской язвы
Примечание. B. anthracoides обладают слабой подвижностью, вызывают гемолиз эритроцитов, непатогенны для морских свинок.
Восприимчивость животных. К сибиреязвенным бациллам чувствительны коровы, овцы, лошади, олени, свиньи. Заражаются они друг от друга пищевым путем, поглощая с кормом споры возбудителя.
Из лабораторных животных наиболее восприимчивы белые мыши, морские свинки, кролики. Эти животные после заражения погибают через 2-4 сут от септицемии. На месте введения наблюдаются отек и гиперемия. Кровь у погибших животных густая и темно-красного цвета, так как сибиреязвенные бациллы обладают антикоагулирующим действием.
Источники заболевания. Больные животные.
Пути передачи. Контактно-бытовой, воздушно-пыльевой, пищевой (при использовании продуктов, зараженных бациллами сибирской язвы).
Человек от человека обычно не заражается, тем не менее при заболевании человека сибирской язвой принимаются все необходимые меры предосторожности.
Патогенез. Входными воротами являются кожа и слизистые оболочки дыхательных путей и пищеварительного тракта. В зависимости от локализации различают кожную, легочную и кишечную формы. Каждая форма может генерализоваться.
Кожная форма — в месте проникновения появляется покраснение, переходящее в папулу (зудящую). Папула медно-красного цвета переходит в везикулу с серозно-геморрагическим содержимым, после подсыхания образуется черный струп (углевик).
Легочная форма — развивается специфическая пневмония, протекающая по типу отека легких. Обычно заканчивается летально.
Кишечная форма — все вышеописанные явления развиваются в слизистой кишечника. Обычно заканчивается летально.
Иммунитет. Довольно стойкий, антимикробный и антитоксический. Зависит от образования протективных антител. Большая роль принадлежит фагоцитарной реакции. В сыворотке переболевших сибирской язвой обнаруживаются антитела, разрушающие капсульную субстанцию бацилл.
При сибирской язве развивается гиперчувствительность, регистрируемая в аллергической пробе с антраксином.
Профилактика. Все мероприятия по предупреждению сибирской язвы проводят совместно с ветеринарной службой Они предусматривают своевременное выявление, изоляцию больных животных, тщательную дезинфекцию территории.
Специфическая профилактика. В настоящее время используют вакцину СТИ, которая была изготовлена в 1942 г. Н. Н. Гинсбургом из бескапсульной культуры. Вакцинируют обычно людей, которые по характеру своей работы связаны с сельскохозяйственными животными. Для экстренной профилактики (людям, контактировавшим с больными) вводят противосибиреязвенный иммуноглобулин и антибиотики.
Лечение. Противосибиреязвенный иммуноглобулин, антибиотики: пенициллин, стрептомицин, тетрациклин.
Контрольные вопросы
1. Опишите морфологию возбудителя сибирской язвы.
2. Опишите культуральные свойства и какая форма: S или R является вирулентной?
3. Какими свойствами обладает сибиреязвенный токсин?
4. Пути передачи и формы заболевания сибирской язвой.
5. Какие факторы обусловливают иммунитет при сибирской язве.
Микробиологическое исследование
Цель исследования: выявление возбудителей сибирской язвы и дифференциация его от антракоида, выявление антигенов возбудителя.
Работа с возбудителем сибирской язвы проводится в строго режимных условиях!
Материал для исследования
1. Содержимое везикул, карбункула, отторгнутый струп (кожная форма).
2. Мокрота (легочная форма).
3. Испражнения (кишечная форма).
4. Кровь (септическая форма).
5. Почва, шерсть животных (для постановки реакции Асколи).
Способы сбора материала
Способы сбора материала
Основные методы исследования
1. Микроскопический.
2. Бактериологический.
3. Биологический.
4. Аллергический.
5. Реакция преципитации Асколи.
Ход исследования
Первый день исследования
Первый день исследования
Второй день исследования
1. Посевы вынимают из термостата. Изучают рост на плотной и жидкой питательной среде. Колонии на плотной питательной среде изучают под микроскопом при малом увеличении. При наличии подозрительных колоний выделяют чистую культуру на скошенный МПА. Посевы инкубируют в термостате.
2. Из бульонной культуры (рост в виде комка ваты на дне, бульон прозрачный) делают висячую каплю (для установления неподвижности — дифференциации от антракойда).
3. Ставят тест «жемчужного ожерелья» (ускоренный метод исследования). С этой целью к бульону Хоттингера добавляют 30% инактивированной лошадиной сыворотки и пенициллин из расчета 0,5 ЕД на 1 мл бульона. Приготовленную среду разливают в пробирки по 2-3 мл и в каждую вносят 2 капли исследуемой бульонной культуры. Посевы инкубируют в термостате 3 ч при температуре 37° С. Затем вынимают их из термостата. Из каждой пробирки делают 2-3 мазка, высушивают на воздухе и фиксируют в жидкости Карнуа (6 частей этилового спирта + 3 части хлороформа + 1 часть ледяной уксусной кислоты). Фиксацию проводят до полного испарения жидкости. Полученные мазки окрашивают метиленовым синим и микроскопируют.
В мазках сибиоеязвенные бациллы обнаруживаются в виде цепи шаров, напоминающих жемчужное ожерелье — результат действия пенициллина.
4. Осматривают зараженных животных. Павших животных вскрывают, делают мазки и мазки-отпечатки, которые фиксируют, окрашивают и изучают под микроскопом. При наличии подозрительных палочек производят посевы на МПА и МПБ.
Третий день исследования
Вынимают посевы из термостата, делают мазки, микроскопируют. На МПА и МПБ бациллы сибирской язвы растут в виде бескапсульных особей. Производят посев на сахара, лакмусовое молоко, желатин, на чашки с 2% кровью и ставят пробу с сибиреязвенным бактериофагом. Посевы инкубируют в термостате.
Четвертый день исследования
Вынимают посевы из термостата и учитывают полученные результаты (см. табл. 46).
Исследование мокроты, испражнений и крови после специальной обработки ведут так же.
Аллергическая проба
Для диагностики сибирской язвы используют аллергическую пробу с сибиреязвенным антигеном (антраксин). Для этого внутрикожно на внутренней поверхности предплечья вводят антраксин. Реакцию учитывают через 24-48 ч. Положительная реакция проявляется с первых дней заболевания.
Реакция Асколи
Реакцию ставят для обнаружения специфического антигена бацилл сибирской язвы в шерсти животных, коже, трупах, почве и т. д.
Приготовление антигена: исследуемый материал измельчают в ступке, заливают 25-50-кратным объемом изотонического раствора натрия хлорида и кипятят (антиген термоустойчив). Полученный экстракт фильтруют через смоченную тем же раствором фильтровальную бумагу. Фильтрат-термоэкстракт — прозрачная жидкость. Для реакции используют преципитирующую сибиреязвенную сыворотку и для контроля сибиреязвенный антиген (рис. 48).
Рис. 48. Реакция Асколи. 1 — преципитирующая сыворотка + исследуемый термоэкстракт; 2 — преципитирующая сыворотка + стандартный сибиреязвенный антиген (контроль); 3 — преципитирующая сыворотка + антиген из шерсти здорового животного (чужеродный антиген); 4 — преципитирующая сыворотка + изотонический раствор хлорида натрия; 5 — нормальная сыворотка + испытуемый антиген
Постановка реакции: 1-я пробирка — преципитирующая сыворотка + исследуемый термоэкстракт;
2-я пробирка — преципитирующая сыворотка + стандартный сибиреязвенный антиген (контроль).
3-я пробирка — преципитирующая сыворотка + термоэкстракт из шерсти здорового животного (контроль).
При положительной реакции в первых двух пробирках образуется преципитационное кольцо, в третьей — кольцо отсутствует.
Реакция эта очень чувствительна (см. рис. 48).
Питательные среды
МПА, МПБ, желатиновая среда (см. главу 7).
Контрольные вопросы
1. Какой материал используют для бактериологического исследования?
2. Основные методы микробиологического исследования.
3. Какие имеются ускоренные методы исследования? Как получить тест «жемчужного ожерелья?»
4. Каким методом можно выявить сибиреязвенные бациллы во внешней среде?
Задание
Нарисуйте схему лабораторного исследования сибирской язвы но дням.
Престижные индивидуалки согласны оттянуться в полный рост с вами предельно пышным отдыхом сексуального характера. Они изящные проститутки будут рады, если вы насвистите им в пустое время и посоветуйте увидеть друг друга.
Источник
Оглавление темы «Возбудитель сибирской язвы. Клинические проявления заражения сибирской язвой. Bacillus cereus.»: Культуральные свойства bacillus anthracis. Культуральные свойства сибирской язвы. Спорообразование сибирской язвой. Биохимические свойства сибирской язвы.Вacillus anthracis хорошо растёт на обычных питательных средах. Температурный оптимум 35-37 °С; оптимум рН 7,0. В жидких средах растёт в виде ватных хлопьев, не вызывая помутнения среды. При посеве уколом в желатину даёт характерный рост в виде «перевёрнутой ёлочки» (рис. 13-4). Позднее верхний слой желатины разжижается, образуя воронку. На твёрдых средах сибирская язва образует шероховатые, неровные, серовато-белые, волокнистые R-колонии диаметром 2-3 мм. При малом увеличении колонии напоминают «голову Медузы» или «львиную гриву» (рис. 13-5); характерный вид колониям придают переплетающиеся цепочки бактерий сибирской язвы.
Спорообразование сибирской язвойВ аэробных условиях при 12 °С и 40 °С палочка сибирской язвы образует центрально расположенные споры, размером 0,8-1,0×1,5 мкм (см. рис. 4-13). В живом организме спорообразования не происходит; также оно отсутствует в невскрытых трупах, что опосредовано поглощением свободного кислорода в процессе гниения. Споры отличает высокая устойчивость к внешним воздействиям: сухой жар убивает бактерии при 140 °С за 2-3 ч, автоклави-рование при 121 °С — за 15-20 мин. В воде они сохраняются до 10 лет, в почве — до 30 лет. Скорость прорастания зависит от температуры (оптимум 37 °С) и возраста спор; молодые споры в оптимальных условиях прорастают за 1-1,5 ч, старые — за 2-10 ч. Биохимические свойства сибирской язвыСибирская язва образует кислоту без газа на средах с глюкозой, фруктозой, мальтозой и декстрином. Гидролизует крахмал; образует ацетоин и лецитиназу. В отличие от сапрофитов, палочки сибирской язвы лишены фосфатазы и не разлагают фосфаты, содержащиеся в питательной среде. Молоко свёртывают за 3-5 сут. Сгусток медленно пептонизируется и разжижается с выделением аммиака, а также (в связи с окислением тирозина) окрашивается в бурый цвет. — Также рекомендуем «Антигенная структура bacillus anthracis. Антигены возбудителя сибирской язвы. Капсульные, соматические антигены сибирской язвы. Патогенность сибирской язвы.» |
Источник
Сибирская язва (Anthrax) — зооантропоноз. К ней восприимчивы
животные многих видов, особенно травоядные, и человек. Болезнь протекает преимущественно
остро с явлениями септицемии или с образованием различной величины карбункулов.
Регистрируют в виде спорадических случаев, возможны энзоотии и эпизоотии.
Возбудитель сибирской язвы — Bacillus anthracis (Cohn, 1872) — относится
к семейству Bacillaceae.
Bacillus
anthracis неподвижная, грамположительная (в молодых и старых культурах
встречаются и грамотрицательные клетки), образующая капсулу (в организме или
при культивировании на искусственных питательных средах с большим содержанием
нативного белка и СО2) и спору палочка, размером 1-1,3 х 3,0-10,0 мкм. При
температуре ниже 12 и выше 42 оС, а также в живом организме или невскрытом
трупе, в крови и сыворотке животных споры не образуются. В окрашенных препаратах
из крови и тканей больных или погибших от сибирской язвы животных бактерии
располагаются одиночно, попарно и в виде коротких цепочек по 3-4 клетки; концы
палочек, обращенных друг к другу, прямые, резко обрубленные, свободные — слегка,
закругленные. Иногда цепочки имеют форму бамбуковой трости.В мазках из культур
на плотных и жидких питательных средах палочки располагаются длинными цепочками.
Культивирование.
Bacillus
anthracis по способу дыхания относят к факультативным анаэробам, хорошо
растет на универсальных средах (МПБ, МПА, МПЖ, картофеле, молоке).Оптимальная
температура роста на МПА 35-37oС, в бульоне 32-33oС.
При температуре ниже 12 и выше 45oС не растет. Оптимум рН сред
7,2-7,6. На поверхности МПА в аэробных условиях при температуре 37oС
17-24-часовые культуры состоят из серовато-беловатых тонкозернистых с серебристым
оттенком, похожих на снежинки колоний, имеющих шероховатый рельеф и характерных
для типичных вирулентных штаммов (R-форма). Диаметр колоний не превышает 3-5
мм.На сывороточном агаре и свернутой лошадиной сыворотке в присутствии 10-50%
углекислоты колонии гладкие полупрозрачные (S-форма), а также слизистые (мукоидные),
тянущиеся за петлей (М-форма), состоящие из капсульных палочек.В МПБ Bacillus
anthracis через 16-24 ч на дне пробирки образует рыхлый белый осадок,
надосадочная жидкость остается прозрачной, при встряхивании бульон не мутнеет,
осадок разбивается на мелкие хлопья (R-форма).При посеве в столбик желатина
на 2-5-е сут появляется желтовато-белый стержень. Культура напоминает елочку,
перевернутую верхушкой вниз. Постепенно верхний слой желатин начинает разжижаться,
принимая сначала форму воронки, затем мешочка.Bacillus anthracis
при росте в молоке вырабатывает кислоту и через 2-4 дня свертывает его и пептонизирует
сгусток.Возбудитель хорошо размножается в 8-12-суточных куриных эмбрионах,
вызывая их гибель на 2-4 дней с момента заражения.
Биохимические свойства.
Ферменты Bacillus anthracis: липаза, диастаза, протеаза, желатиназа,
дегидраза, цитохромоксидаза, пероксидаза, каталаза, лецитиназа и др.Ферментирует
с образованием кислоты без газа глюкозу, мальтозу, сахарозу, трегалозу, фруктозу
и декстрин. На средах с глицерином и салицином возможно слабое кислотообразование.
Арабинозу, рамнозу, галактозу, маннозу, раффинозу, инулин, маннит, дульцит,
сорбит, инозит не сбраживает. Утилизирует цитраты, образует ацетилметилкарбинол
(реакция Фогеса — Проскауэра положительная). Выделяет аммиак. Редуцирует метиленовый
синий и восстанавливает нитраты в нитриты. Некоторые штаммы образуют сероводород.
Токсинообразование.
Bacillus anthracis образует сложный экзотоксин, состоящий из трех
компонентов: эдематогенный фактор (ЕF), протективный антиген (РА) и летальный
фактор (LF) или факторы I, II, III. Эдематогенный фактор вызывает местную
воспалительную реакцию — отек и разрушение тканей. Протективный антиген —
носитель защитных свойств, обладает выраженным иммуногенным действием. Летальный
фактор в смеси со протективным вызывает гибель крыс, белых мышей и морских
свинок.Каждый из трех факторов обладает выраженной антигенной функцией и серологически
активен.Инвазивные свойства микроба обусловлены капсульным полипептидом d-глутаминовой
кислоты и экзоферментами.
Антигенная структура.
В состав антигенов Bacillus anthracis входят неиммуногенный соматический
полисахаридный комплекс и капсульный глутаминполипептид. Полисахаридный антиген
не создает иммунитета у животных и не определяет агрессивных функций микроорганизма.
Устойчивость.
В невскрытом трупе вегетативная клетка микроба разрушается в течение 2-3
сут, в зарытых трупах сохранятся до 4 дней. В замороженном мясе при минус
15oС жизнеспособна 15 дней, в засоленном мясе — до 1,5 мес. В навозная
жиже, смешанной с сибиреязвенной кровью, погибает через 2-3 ч, споры же остаются
в ней вирулентными в течение месяцев. В запаянных ампулах с бульонными культурами
могут оставаться жизнеспособными и вирулентными до 63 лет, в почве — более
50 лет.Спирт, эфир, 2 %-ный формалин, 5 %-ный фенол, 5-10 %-ный хлорамин,
свежий 5 %-ный раствор хлорной извести, перекись водорода разрушают вегетативные
клетки в течение 5 мин. Этиловый спирт 25-100 % убивает споры в течение 50
дней и более, 5 %-ный фенол, 5-10%-ный раствор хлорамина — от несколько часов
до нескольких суток, 2 %-ный раствор формалина — через 10-15 мин, 3%-ный раствор
перекиси водорода — через 1 ч, 4 %-ный раствор перманганата калия — через
15 мин, 10 %-ный раствор гидроокиси натрия — через 2 ч.Вегетативные клетки
при нагревании до 50-55oС гибнут в течение 1 ч, при 60 oС
— через 15 мин, при 75 oС — через 1 мин, при кипячении — мгновенно.При
медленном высушивании наступает спорообразование и микроб не гибнет. При минус
10oС бактерии сохраняются 24 дня, при минус 24oС — 12
дней.Воздействие прямого солнечного света обезвреживает бактерии через несколько
часов.Сухой жар при температуре 120-140oС убивает споры через 2-3
ч, при 150oС — через 1 ч, текущий пар при 100oС — через
12-15 мин, автоклавирование при 110oС — за 5-10 мин, кипячение
— через 1 ч.Возбудитель сибирской язвы проявляет высокую чувствительность
к пенициллину, хлортетрациклину и левомицетину, а также к лизоциму. Бактериостатическим
эффектом на протяжении 24 ч обладает свежевыдоенное молоко коров.
Патогенность.
К возбудителю сибирской язвы восприимчивы все виды млекопитающих. Чаще болеют
овцы, крупный рогатый скот, лошади, козы, буйволы, верблюды и северные олени,
могут заражаться ослы и мулы. Свиньи менее чувствительны. Среди диких животных
восприимчивы все травоядные. Известны случаи заболевания собак, волков, лисиц,
песцов, среди птиц — уток и страусов.
Патогенез.
Заражение животных происходит преимущественно алиментарно. Через поврежденную
слизистую пищеварительного тракта микроб проникает в лимфатическую систему,
а затем в кровь, где фагоцитируется и разносится по всему организму, фиксируясь
в элементах лимфоидно-макрофагальной системы, после чего снова мигрирует в
кровь, обусловливая септицемию.Капсульное вещество ингибирует опсонизацию,
в то время как экзотоксин разрушает фагоциты, поражает центральную нервную
систему, вызывает отек, возникает гипергликемию и повышается активность щелочной
фосфатазы.В терминальной фазе процесса в крови снижается содержание кислорода
до уровня, несовместимого с жизнью.
Лабораторная диагностика.
Для лабораторного исследования на сибирскую язву направляют ухо павшего животного.
Бактериоскопия. Из патологического материала для микроскопии готовят
мазки, часть красят по Граму и обязательно на капсулы по Михину и Ольту. Обнаружение
типичных по морфологии капсульных палочек является важным диагностическим
признаком.Посев на питательные среды. Исходный материал засевают в МПБ и на
МПА (рН 7,2-7,6), инкубируют посевы при температуре 37oС в течение
18-24 ч, при отсутствии роста их выдерживают в термостате еще 2 сут.Биологическая
проба. Осуществляется на белых мышах, морских свинках, кроликах, одновременно
с посевом материала на питательные среды. Белых мышей заражают подкожно в
заднюю часть спины (по 0,1-0,2 мл), морских свинок и кроликов — под кожу в
область живота (по 0,5-1,0 мл). Мыши погибают через 1-2 сут, морские свинки
и кролики — через 2-4 сут. Павших животных вскрывают, делают мазки и посевы
из крови сердца, селезенки, печени и инфильтрата на месте инъекции исследуемого
материала.Идентификация. Возбудителя сибирской язвы следует дифференцировать
от сапрофитных бацилл: B. cereus, B. megaterium, B. mycoides и B.
subtilis на основе главных и дополнительных признаков. К главным признакам
относятся патогенность, капсулообразование, тест «жемчужного ожерелья», лизабельность
фагом, иммунофлюоресцентный тест. Дополнительными являются подвижность, отсутствие
гемолиза, лецитиназная активность, образование фосфатазы.
| Тест | B. anthracis | B. cereus, B. megaterium, B. mycoides, B. subtilis |
|---|---|---|
| Патогенность | Патогенна для лабораторных животных | Не патогенны для лабораторных животных, за исключением B.cereus (при внутрибрюшинном заражении белых мышей). |
| Капсулообразование | Образует массивную с четкими контурами капсулу. | Капсулу не образуют. |
| «Жемчужное ожерелье» | На агаре с пенициллином возбудитель растет в виде цепочек, состоящих из шарообразных форм, напоминающих ожерелье из жемчуга. | Феномен «жемчужного ожерелья» отсутствует. |
| Лизабельность фагом | Лизируется сибиреязвенный фагом. | Лизис сибиреязвенный фагом отсутствует. |
| Иммунофлюоресцентный тест1 | Положительный | Отрицательный |
| Подвижность | Неподвижна | Подвижны |
| Гемолитеческая активность2 | Как правило не гемолизирует эритроциты барана, или лизирует очень медленно. | Гемолизируют эритроциты барана.
|
| Лецитиназная активность | Желток куриного яйца свертывает медленно или вообще не свертывает (левый сектор) | B.cereus интенсивно синтезирует лецитиназу (верхний сектор) |
| Образование фосфатазы | Отсутствует | Имеется |
1 — ориентировочный метод и требует дополнительного
изучения вирулентности, капсулообразования, фагочувствительности.
2 — признак вариабелен у разных штаммов.
Серологическое исследование.
Для обнаружения сибиреязвенных антигенов при исследовании кожевенного и мехового
сырья, загнившего патологического материала, а также свежего патологического
материала и серологической идентификации выделенных культур применяют реакцию
преципитации по Асколи.В качестве серологического теста, главным образом для
изучения антигенного спектра Bacillus anthracis, применяют реакцию диффузионной
преципитации (РДП).Для выявления свежих случаев и ретроспективной диагностики
сибирской язвы у человека предложен аллерген антраксин (Э. Н. Шляхов, 1961).
Им выявляют и специфическую поствакцинальную сенсибилизацию у сельскохозяйственных
животных.
Иммунитет.
Формирование иммунитета инфекции по типу антитоксического обуславливает протективный
антиген.В настоящее время защитные антитела обнаружены при помощи РСК, РДП
и непрямого варианта метода флюоресцирующих антител.В результате естественного
заражения и переболевания сибирской язвы у животных возникает длительный иммунитет.С
целью активная защита животных от сибирской язвы применяют живые споровые
сибиреязвенные вакцины: вакцина СТИ (иммунитет наступает через 10 дней и длится
не менее 12 мес), вакцина из штамма № 55 (иммунитет наступает через 10 дней
и сохраняется не менее 1 года).Для лечения и пассивной профилактики применяют
противосибиреязвенную сыворотку и глобулин. Иммунитет наступает через несколько
часов и сохраняется до 14 дней.
Источник