Отбор проб при сибирской язве
Сибирская язва — особо опасная инфекционная болезнь животных и человека. Болезнь у животных протекает сверхостро, остро и подостро, а у свиней бессимптомно, в основном в локальной ангинозной форме. Болезнь у человека чаще всего проявляется как инфекция кожных покровов и лишь изредка осложняется сибиреязвенным сепсисом: вместе с тем может развиться и первичная генерализованная инфекция, проявляющаяся в легочной или кишечной форме.
Историческая справка. Сибирская язва была известна еще в древности, в частности, со времен Гиппократа. Из-за своей контагиозности и выживания возбудителя в почве она нанесла большой ущерб человечеству. Зараженные пастбища называли «проклятыми полями» в связи с тем, что возбудитель сохранялся в их почве годами. Луи Пастеру, увлеченно изучавшему эту болезнь, удалось в: 1880—1881 гг. создать вакцину из возбудителя с ослабленной вирулентностью, предназначенную для профилактики сибирской язвы у животных. Весть об этом облетела весь мир.
Возбудитель болезни Сибирская язва (Anthrax) вызывается палочковидным микробом В. anthracis, которого выделил и описал Кох в 1876 г. Длина бациллы 3—10 мкм, толщина 1—2 мкм; она неподвижна и очень устойчива во внешней среде благодаря тому, что в неблагоприятных условиях образует споры. Спорообразование — способ сохранения микроорганизма. Споры образуются в почве, в крови, вытекшей от павшего животного, или в трупах после вскрытия, поскольку обязательными условиями спорообразования являются присутствие кислорода и оптимальная температура.
Пути передачи. Споры сибирской язвы сохраняются годами на волосе, кожах, в почве, в кормах. Сулема (1 %), карболовая кислота (5 %) разрушают их за несколько дней. 5 %-ная хлорная известь уничтожает их быстрее. Сибирской язвой чаще болеют травоядные животные (овцы, крупный рогатый скот, лошади), реже — свиньи. Восприимчивы, но заболевают очень редко собаки и кошки. Основным фактором передачи возбудителя сибирской язвы являются почва или другие объекты внешней среды, инфицированные спорами возбудителя.
Споры поступают в организм вместе с кормом; если корм, грубый и вызывает небольшие повреждения пищеварительного тракта, споры легко проникают через них в кровяное русло, где из них развивается вегетативная форма. Инфицированные животные болеют сами и заражают человека (персонал животноводческих ферм, лиц, контактирующих с продуктами убоя животных — мясников, кожевников, меховщиков, работников шерстеперерабатывающей промышленности, ветеринарных специалистов и т. д.). Регистрируются также спорадические случаи сибирской язвы при случайном потреблении сырого или непроваренного мяса больных животных.
Таким образом, человек заражается сибирской язвой непосредственно при контакте с больными животными или косвенно через сырые или переработанные продукты. Возможность для проникновения микроба через кожу, если на ней есть небольшие ранения или царапины, и возникновения инфекции создается при контакте человека с больным животным, шкурами и кровью во время убоя. В этом случае «воротами инфекции» является кожа, и болезнь проявляется в кожной форме или форме карбункула. Кишечная форма (кишечный карбункул) встречается у человека намного реже и обусловлена употреблением в пищу зараженного мяса вынужденно убитых животных, не прошедшего ветеринарно-санитарного контроля и достаточной тепловой обработки.
Заражение человека происходит также при обработке снятых с вынужденно убитых животных шкур (споры могут содержаться в них даже после дубления), шерсти, волоса, мехов и т. д. На промышленных предприятиях, где образуется зараженная сибиреязвенными спорамипыль (чесание шерсти), наблюдается легочная форма сибирской язвы вследствие проникновения возбудителя аэрогенным путем. Заболеваемость людей возрастает во время максимальной заболеваемости животных, т. е. в июле — сентябре.
Источник возбудителя инфекции — больное животное. Экскреты заболевших животных (кал, моча, кровянистые истечения из естественных отверстий) содержат бациллы, которые на воздухе превращаются в споры. Контаминированные сибиреязвенными спорами участки почвы и другие объекты внешней среды длительное время являются резервуарами и факторами передачи возбудителя инфекции.
Основной путь заражения животных — алиментарный — через корма и воду. Возможны также трансмиссивный и аспирационный пути заражения.
Заражение человека происходит при уходе за больными животными, в процессе их убоя, снятия шкур, разделки туш, кулинарной обработки мяса, уборки и уничтожения трупов, при хранении, транспортировке, первичной переработке и реализации контаминированного животного сырья. Возможно заражение человека при контакте с контаминированной почвой, а также аспирационным и трансмиссивным путями.
Порядок отбора проб для исключения сибирской язвы
При подозрении на сибирскую язву трупы животных не вскрывают. В лабораторию направляют ухо павшего животного со стороны, на которой лежит труп, предварительно перевязанное у основания шпагатом или другим материалом в двух местах и отрезанное между перевязками. Место разреза прижигают раскаленным металлическим предметом.
Если подозрение на сибирскую язву возникло в процессе вскрытия трупа или разделки туши, работу немедленно прекращают и направляют для исследования часть селезенки и пораженные лимфоузлы.
От трупов свиней для исследования берут участки отечной ткани, заглоточные или подчелюстные лимфоузлы.
Трупы мелких животных направляют в лабораторию целиком.
До получения результатов лабораторного исследования трупы, мясо или туши со всеми внутренними органами и шкурой оставляют на месте в условиях строгой изоляции.
Сроки исследования в ветеринарной лаборатории:
микроскопического — в день поступления материала,
бактериологического — до 3-х суток,
биологического — до 10 суток.
При получении положительных результатов микроскопического исследования биоматериала на сибирскую язву ветеринарная лаборатория немедленно дает предварительный ответ главному государственному ветеринарному инспектору АО (города) и владельцу животного.
Трупы животных, павших от сибирской язвы, а также все продукты убоя, полученные в случаях убоя больных сибирской язвой животных, сжигают; захоронение (зарывание) категорически запрещается.
Диагноз сибирской язвы у животного считают установленным в одном из следующих случаев:
— выделения из патматериала культуры сибирской язвы и гибели хотя бы одного из двух зараженных лабораторных животных и выделения из его органов культуры со свойствами, характерными для возбудителя сибирской язвы;
— гибели хотя бы одного лабораторного животного из двух, зараженных исходным материалом, с последующим выделением из его органов культуры Васillus anthracis даже при отсутствии роста культуры из патматериала;
— получения положительной реакции преципитации при исследовании загнившего патматериала;
— получения положительной реакции преципитации при наличии характерной клинической картины и патологоанатомических изменений у свиней даже при отсутствии культуры в высевах из исходного материала и отрицательном результате биопробы.
Симптомы сибирской язвы
Сибирская язва протекает у животных остро в септической форме (бациллы переносятся кровью) с местными проявлениями у «ворот инфекции». Характерные изменения следующие: кровь темная, несвертывающаяся, селезенка сильно увеличена, наполнена кровью, грязного цвета, часто наблюдается гематурия.
У овец (по-видимому, наиболее восприимчивых животных) болезнь может протекать молниеносно. Симптомы сибирской язвы следующие: животные приходят в возбуждение, беспокоятся, дыхание учащенное, из носа и анального отверстия появляется кровянистая жидкость.
У лошадей болезнь протекает с признаками общих нарушений (лихорадочное состояние, отсутствие аппетита, учащенное дыхание и пульс), к которым присоединяются местные изменения, кожные или кишечные. При кожной (карбункулезной) форме появляется либо карбункул на месте внедрения возбудителя, либо безболезненный инфильтрат (отек). При кишечной форме животные испытывают сильные боли в кишечнике в виде колик, что сопровождается кровавым поносом вследствие образования язв в месте проникновения бацилл.
У крупного рогатого скота симптомы сибирской язвы такие же, что и у овец, но течение менее острое.
У свиней болезнь большей частью протекает хронически в форме ангины или с поражением подчелюстных лимфатических узлов. Глотка и гортань воспалены и опухают, образуются зоны изъязвления, закрытые пленками.
Симптомы сибирской язвы у человека
Сибирская язва у человека проявляется в двух формах: кожной и висцеральной. Кожный карбункул
является следствием локализации возбудителя в коже. В зависимости от тяжести поражения образуется злокачественная пустула. При висцеральной форме карбункул локализуется в кишечнике или легких.
При кишечной форме болезнь начинается внезапно лихорадкой, ознобом, сильными болями в животе в виде колик, стул частый, жидкий, с кровью , как при холере. Живот расслабленный, вздутый, селезенка увеличена. Легочная форма протекает в виде сибиреязвенной бронхопневмонии: с лихорадкой, кашлем, кровавой мокротой, с которой выделяются сибиреязвенные бациллы.
Считается, что во всем мире ежегодно заболевают сибирской язвой от 20 000 до 100 000 человек (Тома, 1976). Из лечебных препаратов применяют пенициллин, тетрациклин или хлорамфеникол. В тяжелых случаях прибегают к специфической иммунной сыворотке.
Дезинфекция
Навоз, подстилку и остатки корма, загрязненные выделениями больных животных, сжигают. Навозную жижу в жижесборнике смешивают с сухой хлорной известью, содержащей не менее 25% активного хлора, из расчета 1 кг извести на каждые 20 л навозной жижи.
Для дезинфекции загрязненных возбудителем поверхностей применяют одно из следующих дезинфицирующих средств: 10%-ный горячий раствор едкого натра, 4%-ный раствор формальдегида, растворы хлорной извести, двутретиосновной соли гипохлорита кальция, нейтрального гипохлорита кальция, ДП-2, тексанита с содержанием 5% активного хлора, 10%- ный однохлористый йод (только для деревянных поверхностей), 7%-ный раствор перекиси водорода с добавлением 0,2% молочной кислоты и 0,2% ОП-7 или ОП-10, 2%-ный раствор глутарового альдегида.
Дезинфекцию указанными средствами (кроме однохлористого йода, перекиси водорода и глутарового альдегида) проводят трехкратно с интервалом в 1 ч. из расчета 1 л раствора на 1 кв. м в типовых помещениях и 2 л раствора на 1 кв. м в помещениях, приспособленных для содержания животных.
При применении однохлористого йода поверхность обрабатывают двукратно с интервалом 15-30 минут при норме расхода 1 л на 1 кв. м площади, а при использовании перекиси водорода и глутарового альдегида — двукратно, с интервалом в 1 ч. исходя из того же расчета.
После последнего нанесения раствора дезинфектанта помещение закрывают на 3 часа и затем проветривают. Кормушки и поилки обмывают водой.
Для дезинфекции поверхностей при низкой (минусовой) температуре применяют растворы хлорной извести, двутретиосновной соли гипохлорита кальция с содержанием 8% активного хлора, препарата ДП-2 и нейтрального гипохлорита кальция с содержанием 5% активного хлора. Указанные растворы готовят непосредственно перед применением на теплом (40-50 град. С) 15%-ном (при наружной температуре от 0 до минус 15 град. С) или 20%-ном (при температуре до минус 20 град. С) растворе поваренной соли.
Растворы наносят трехкратно с интервалом 1 ч при норме расхода 0,5-1 л на 1 кв. м. Для обеззараживания деревянных поверхностей применяют также 10%-ный раствор однохлористого йода — трехкратно с интервалом 15-25 минут по 0,3-0,4 л на 1 кв. м после предварительного увлажнения поверхностей 20%-ным раствором поваренной соли из расчета 0,5 л на 1 кв. м. Экспозиция во всех случаях — 12 часов после последнего нанесения дезраствора. По окончании экспозиции кормушки и поилки обмывают водой, помещение проветривают.
Почву на месте падежа, вынужденного убоя больного животного или вскрытия трупа животного, павшего от сибирской язвы, орошают раствором хлорной извести, содержащим 5% активного хлора, из расчета 10 л на 1 кв. м. После этого почву перекапывают на глубину 20-25 см, перемешивают с сухой хлорной известью, содержащей не менее 25-28% активного хлора, из расчета на 3 части почвы одну часть хлорной извести. После этого почву увлажняют водой.
Обеззараживание почвенных очагов сибирской язвы проводят бромистым метилом в соответствии с действующими инструкциями. После обеззараживания почвенный очаг считается ликвидированным и соответствующие ограничения снимаются.
Транспортные средства, использованные для перевозки больных сибирской язвой животных, продуктов их убоя или контаминированного сырья животного происхождения, обеззараживают в соответствии с действующей инструкцией «Проведение ветеринарной дезинфекции объектов животноводства».
Спецодежду, щетки, скребницы, ведра и другой мелкий инвентарь обеззараживают путем погружения на 4 часа в 1%-ный активированный раствор хлорамина, 4%-ный раствор формальдегида или кипятят в 2%-ном растворе кальцинированной соды не менее 90 мин.
Меховые изделия, кожаную, резиновую обувь и другие портящиеся при указанном выше методе дезинфекции вещи обеззараживают парами формальдегида в пароформалиновых камерах при расходе 250 мл формалина на 1 куб. м объема камеры, температуре 58-59 град. С и экспозиции 3 ч. Ценные меха обрабатывают в специальных герметических камерах бромистым метилом (в соответствии с инструкцией).
Нормативные документы:
• Санитарные правила СП 3.1.089-96 и Ветеринарные правила ВП 13.3.1320-96 «Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных. Сибирская язва»;
• «Правила проведения дезинфекции и дезинвазии объектов государственного ветеринарного надзора», утвержденные Минсельхозом России 15.07.2002г. № 13-5-2/0525;
• «Правила ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов», утвержденные Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 27декабря 1983 г. по согласованию с Главным санитарно-эпидемиологическим управлением Министерства здравоохранения СССР. (с изменениями от 17 июня 1988 г.);
• ГОСТ 21237-75 «Мясо.Методы бактериологического анализа»;
• Методические указания по лабораторной диагностике сибирской язвы у животных и людей и обнаружению возбудителя сибирской язвы в сырье животного происхождения и объектах внешней среды, утвержденные 01.09.1986 г.ГУВ Госагропрома СССР и ГУКИ МЗ СССР.
Источник
(утв. Министерством здравоохранения СССР 27 сентября 1984 г.)
Введение
Возбудитель сибирской
язвы, попадая в почву, на протяжении многих десятилетий не только
сохраняется, но и накапливается за счет многократных вегетаций и
споруляций. При этом состояние инфицированности почвы представляет
собой явление динамическое, подверженное изменчивости во времени
количественном и качественном отношении под влиянием меняющихся
условий окружающей среды. Наиболее благоприятными являются
следующие физико-химические характеристики почв: температура не
ниже 12-15°С, влажность в пределах 29-85%, рН — 5,3-7,3; наличие
1-14% гумуса, присутствие 14-38 мг фосфора 6-18 мг калия на 100 г
почвы. В зависимости от перечисленных и целого ряда других факторов
(антропогенное воздействие, наличие актиномицетов-антагонистов,
влияние ризосферы высших растений) происходит накапливание
возбудителя сибирской язвы в почве или сохранение единичных
микробов с измененными культурально-морфологическими свойствами и
сниженной вирулентностью.
Возбудитель сибирской
язвы преимущественно находится в почве на глубине от 1,2 до 2 м,
так как именно на этом уровне осуществлялось в прошлом захоронение
трупов сибиреязвенных животных. В результате ливневых паводковых
потоков, эрозионных процессов или антропогенного воздействия
возможен вынос возбудителя в поверхностный слой почвы, составляющий
до 40 см и наиболее опасный в эпизоотическом и эпидемическом
отношении. Кроме того, поверхностное загрязнение почвы происходит
при падеже и вынужденном убое сибиреязвенных животных.
Систематическое
бактериологическое исследование почвы в местах падежа, вынужденного
убоя или захоронения сибиреязвенных животных является важным
моментом в системе противоэпидемических мероприятий и позволяет
осуществлять оперативное слежение за состоянием очагов сибирской
язвы.
До настоящего времени
отсутствуют унифицированные подходы к отбору проб почвы и
соблюдению противоэпидемического режима при работе на участках,
зараженных возбудителем сибирской язвы.
В
настоящих методических рекомендациях излагаются методика отбора
проб почвы с применением бура Малькова модифицированного авторами,
меры личной профилактики, способы обеззараживания инструментария и
остатков проб почвы.
Методика отбора проб почвы для бактериологического исследования на
наличие возбудителя сибирской язвы и
актиномицетов-антагонистов
Отбор проб почвы для
бактериологического исследования на участках захоронения, в местах
падежа или вынужденного убоя сибиреязвенных животных проводится по
эпидемиологическим показаниям, а также при осуществлении
динамического наблюдения за очагом. При контроле активности очага в
местах захоронения отбор проб почвы следует проводить в
летне-осенний период, наиболее благоприятный для вегетации
возбудителя сибирской язвы. Необходимо максимально охватывать
исследованиями весь участок очага как по площади, так и по глубине.
Так как вероятность бактериологической находки возбудителя
сибирской язвы в местах захоронения составляет 1-2%, число проб из
одного очага должно составлять не менее 100.
Работа по отбору проб
проводится в защитном костюме II типа с применением дезинфицирующих
средств.
Бригада отборщиков проб
почвы состоит из двух человек. К месту отбора проб она направляется
на выделенном транспорте со специальной укладкой (приложенеие
1).
1. На территории очага
выбирается участок размером от 8 до 16 м в зависимости от площади захоронения.
2. Намечаются 5 точек
отбора проб почвы (4 точки по углам и одна в центре) при отборе
проб почвы на глубину до 2 м или 6 точек (4 точки по углам и две в
центре) при отборе проб на глубину до 1,6 м. При захоронении
сибиреязвенных животных в траншеи отбор проб необходимо проводить в
5 или 6 точках (в зависимости от глубины отбора проб),
расположенных по ходу траншеи.
3. Совком (ножом)
производится расчистка намеченных точек отбора проб от мусора,
листьев и травы.
4. Отбор проб почвы
осуществляется при помощи модифицированного бура Малькова
(приложение 2).
5. У места отбора проб
почвы расстилается полиэтиленовая пленка размером не менее 100×100
см, над которой отобранная почва ссыпается в мешочки.
6. По эпидпоказаниям (при
падеже или прирезке сибиреязвенного животного) определяется
поверхностное загрязнение почвы возбудителем сибирской язвы путем
отбора проб в каждой намеченной точке на глубине до 40 см. При этом
количество проб составляет не более 20.
При динамическом
наблюдении за очагом (в местах захоронения сибиреязвенных животных)
отбор проб почвы производится на глубине 1,6-2 метров через каждые
10 см (рис.1).
7. Вес каждой пробы,
взятой в одной точке отбора, должен быть равен 40-50 г (2 столовых
ложки).
8. Отобранные на каждой
глубине из 5 или 6 точек пробы объединяются в один матерчатый
мешочек, на котором простым карандашом отмечается глубина отбора
пробы (10, 20, 30 см и т.д.). Полиэтиленовые мешочки не
используются, так как это может привести к гибели возбудителя или
изменению его свойств.
9. Пробу почвы для
лабораторного исследования на наличие актиномицетов-антагонистов
следует отбирать в одной из пяти точек на глубине 20 см весом 10 г
в отдельный полиэтиленовый мешочек с целью создания благоприятных
условий для сохранения и накопления актиномицетов-антагонистов.
10. Для определения
химического состава почв пробу весом 100 г отбирают в матерчатый
мешочек в одной точке на глубине 20 см на контрольном участке с
однотипной структурой почв, расположенном в 100 м от
скотомогильника.
11. Пронумерованные
мешочки с пробами почвы для исследования на наличие возбудителя
антракса помещают по 5-6 штук в металлические пеналы. В один из
этих пеналов помещают пробу почвы, предназначенную для исследования
на наличие актиномицетов. Пробу для химического анализа помещают в
отдельный пенал.
12. После отбора проб
остатки почвы, находящиеся на полиэтиленовой пленке, ссыпают в
образовавшиеся шурфы. Сверху засыпают хлорной известью (200 г на
каждый шурф) и увлажняют. Использованную полиэтиленовую пленку
протирают ветошью, смоченной в 6% растворе перекиси водорода с 0,5%
раствором моющего средства.
13. Пеналы с наружной
стороны обрабатывают 6% раствором перекиси водорода с 0,5%
раствором моющего средства.
14. Бур, лопатку и совок
(нож) обжигают пламенем паяльной лампы, затем обрабатывают ветошью,
смоченной 6% раствором перекиси водорода с 0,5% раствором моющего
средства.
15. Отборщики
обрабатывают обувь 6% раствором перекиси водорода с 0,5% раствором
моющего средства и отправляются к месту стоянки транспорта, где
снимают защитную одежду (маски, халаты, косынки) и помещают ее в
клеенчатый мешок, обрабатывая руки в резиновых перчатках 6%
раствором перекиси водорода с 0,5% моющего средства после каждой
манипуляции. После снятия перчаток моют руки с мылом.
16. Пеналы оклеивают
лейкопластырем, бур и лопатку помещают в чехол, выписывают
направления.
Отобранные пробы почвы
должны быть доставлены в лаборатории для исследования в течение 1-3
суток.
Примечание. В
случае травмы с нарушением кожных покровов в процессе отбора проб
почвы в очаге сибирской язвы необходимо промыть рану водой с мылом,
обработать настойкой йода и наложить повязку. В дальнейшем
предпринять меры по экстренной профилактике заболевания сибирской
язвой.
При
составлении «Рекомендаций» использованы:
1. Инструкция и
методические указания по лабораторной и клинической диагностике,
профилактике и лечению сибирской язвы у людей.
Москва, 1980.
2. Организация
мероприятий по профилактике сибирской язвы (методические
рекомендации).
Кишинев, 1980.
3. Методические указания
по обнаружению возбудителя сибирской язвы в сырье животного
происхождения и объектах внешней среды. Утв. Главным управлением
ветеринарии МСХ СССР 1.II.79 г.
4. Инструкция о противоэпидемическом режиме работы
с материалом, зараженным или подозрительным на зараженность
возбудителями инфекционных заболеваний I-II групп.
Саратов, 1979.
5. Методические
рекомендации по использованию актиномицетов-антагонистов для
обеззараживания почв, загрязненных возбудителем сибирской язвы.
Киев, 1978.
Приложение 1. Опись укладки для отбора проб почвы для лабораторного
исследования на наличие возбудителя сибирской язвы и актиномицетов
в одном очаге сибирской язвы
Приложение 1
N | Наименование | Единица | Количество | Примечание |
1. | Бур Малькова | шт. | 1 | |
2. | Совок металлический | « | 1 | |
3. | Мешочек из плотной ткани с | « |
Источник